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ELISA分析仪器
发布时间:2013-12-19 点击次数:1123次

ELISA分析仪器

    ELISA试剂技术20世纪80年代引入中国,现已被广泛应用。与之相关的分析仪器也得到了快速发展,我国先后出现了十余家酶标仪、洗板机生产厂商,在中国市场上与众多的进口酶标仪器进行紧张竞争。下面分三个方面对ELISA中有关仪器及其在中国的应用作一简要介绍。

    分离式酶联免疫仪器

    分离式酶联免疫仪器主要有酶标仪、洗板机。在血清离心之后,经过加样、洗板、孵育等过程,zui后通过吸光度判定结果。ELISA实验在国内主要用于定性检验,故目前的分离式仪器基本上可以满足。

    酶标仪本质上是一台专用于微孔板的、可见光范围的光电比色计。在ELISA实验中,酶标仪是测定各微孔中试样的吸光度的关键仪器,对试验结果的判定有直接影响,是实验室必备的重要仪器之一。随着ELISA技术的普及,酶标仪得到了很大发展,产品种类齐全,型号多样,各有特色。目前国内市场上销售的酶标仪已完全摆脱原来的单孔测量方式,整板测量、定性定量计算、存储、多种报告格式、滤光片自动转换等已成为基本的、必备的功能,各种新推出的酶标仪性能日益完善,功能不断扩充。具体有:

(1)   测量高速化 从目前不断推出的酶标仪趋势来看,整板测量速度均在10s以内,这有利于防止测量过程中各微孔吸光度的微小变化,尽可能克服环境对结果的影响,同时可以满足动力测量的要求,测量速度在20s以上的仪器将处于不利于地位。我国现生产的酶标仪,测量整板速度一般为25s,产品更新周期较长。

(2)   宽吸光度范围  尽管酶标仪A=0-2。5的吸光度范围完全可以满足实验的要求,但国外新推出的仪器都扩宽了早期型号的吸光度范围,较的酶标仪其线性范围可以达到A=4.0,并且保持很好的精密度,如BIORAD公司的Benchmark,400-750nmA=0-4。0时其重复性与线性均不大于3.5%。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度读数范围达A=0-4.0,在A=3.0-4.0范围,其线性不超过2%, RSD小于1。0%

(3)   扩展到紫外 增加紫外滤光片几乎是厂商的共同选择。由于各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的机构,可以同时安装6-8片滤光片,扩展紫外功能相对容易,一般都增加340nm滤光片。

(4)   具有孵育功能 可以自动、控制反应温度,使微孔板的孵育过程在仪器内部完成,降低外界干扰,简化操作步骤。如BIORAD公司的Benchmark,芬兰LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等。

(5)   具有动力学检测功能   常规ELISA是一种终点法测量实验,测量前需要加入终止液来抑制酶免反应的进行,通过吸光度的大小来计算待测物质的浓度,动力学方法是通过测定反应过程中吸光度的变化速率来计算相应的待测物质的含量的,酶标仪的测量速度加快后,只要增加相应的软件,就可以使用酶标仪完成某些生化指标的动力学测量。

洗板机是ELISA试验保证洗涤效果、进而保证实验质量的重要仪器,洗板机的作用已不再是简单的代替人的手工劳动的自动化装置。目前国内的洗板机除提供常规的设备清洗次数、清洗条数、浸泡时间等基本功能之外,还根据用户的需要分别增加了底部冲洗、两点吸液、板式/条式洗板、震荡、位置调节及自动清洗管路、自动换液存储多种洗板程序等功能,清洗残留量由原来的5-6UL/孔减小到2UL/孔,有的洗板机允许用户对洗板过程的每一步的流量、时间、位置等进行详尽的设定。生产厂商根据各自对洗板技术的研究,努力提高仪器可靠性与自动化程度,同时为用户提供一个zui佳的、完善的洗涤环境。国内洗板机就洗板效果、产品可靠性等主要指标已达到进口以前的水平,与进口仪器相比,其价格、售后服务占一定优势,主要差距是无定量加液。

组合式的酶联免疫仪器

 组合式的酶联免疫仪器分三类:全自动酶联免疫系统、自动样品处理系统、流水线作业式组合系统。前两者主要用于各大血站、医院,后者主要用于试剂生产厂商。

全自动酶联免疫系统是将ELISA试验中的各个步骤,从加样、孵育、洗涤、震荡、闭塞到定性或定量分析、报告存储与打印功能全部集成在一台仪器中,由仪器按用户事先设计的程序自动进行。HAMILTON公司的FAME(世界上*台自动板式ELISA系统)BIORAD公司的CAA、奥斯邦公司的AMPTECAN公司的MinilyserORGANO公司的TEKTIME、意大利S。P。A。 DIVISION  STRUMENTIPersonaiLAB等全自动酶联免疫系统已先后进入国内市场。近两年新进入中国市场还有DYNDRX、公司的DSX、 阿克苏公司的Flextk2BIOASIA代理的TRITURUS等。全自动酶联免疫系统的出现满足了各大医院、血站大批量重复检验的要求,提高了这些单位的检查检验效率与实验水平,有效控制了大批量检验中极有可能出现的人工操作失误,有利于ELISA实验的质量保证与提高,其国内市场稳步增长。

自动样品处理系统主要用于完成ELISA实验中的繁琐无味、人工容易出错的加样、稀释滴定、孵育、洗涤等步骤,完成之后再由酶标仪判定结果。使用自动样品处理系统利用原有的酶标仪,既节约资金,又实现了实验过程的自动化,是一种很经济的方案。


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